Leica Patio Umbrella Pax 5 1EW User Manual

Bond Ready-To-Use Primary Antibody  
Pax-5 (1EW)  
Catalog No: PA0552  
EN  
FR  
IT  
DE  
ES  
PT  
SV  
EL  
DA  
Instructions for Use  
Please read before using this product.  
Mode d’emploi  
Á lire avant d’utiliser ce produit.  
Istruzioni per L’uso  
Si prega di leggere, prima di usare il prodotto.  
Gebrauchsanweisung  
Bitte vor der Verwendung dieses Produkts lesen.  
Instrucciones de Uso  
Por favor, leer antes de utilizar este producto.  
Instruções de Utilização  
Leia estas instruções antes de utilizar este produto.  
Instruktioner vid Användning  
Var god läs innan ni använder produkten.  
Οδηγίες χρήσης  
Παρακαλούμε διαβάστε τις οδηγίες πριν χρησιμοποιήσετε το προϊόν αυτό.  
Brugsanvisning  
Læs venligst før produktet tages i brug.  
Check the integrity of the packaging before use.  
Vérifier que le conditionnement est en bon état avant l’emploi.  
Prima dell’uso, controllare l’integrità della confezione.  
Vor dem Gebrauch die Verpackung auf Unversehrtheit überprüfen.  
Comprobar la integridad del envase, antes de usarlo.  
Verifique a integridade da embalagem antes de utilizar o produto.  
Kontrollera att paketet är obrutet innan användning.  
Ελέγξτε την ακεραιότητα της συσκευασίας πριν από τη χρήση.  
Kontroller, at pakken er ubeskadiget før brug.  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Bond Ready-To-Use Primary Antibody  
Pax-5 (1EW)  
Catalog No: PA0552  
Intended Use  
This reagent is for in vitro diagnostic use.  
Pax-5 (1EW) monoclonal antibody is intended to be used for the qualitative identification by light microscopy of human Pax-5 in formalin-  
TM  
fixed, paraffin-embedded tissue by immunohistochemical staining using the automated Bond system.  
The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies and proper controls and  
should be evaluated within the context of the patient’s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist.  
Summary and Explanation  
Immunohistochemical techniques can be used to demonstrate the presence of antigens in tissue and cells (see “Using Bond Reagents”  
in your Bond user documentation). Pax-5 (1EW) primary antibody is a ready to use product that has been specifically optimized for use  
with Bond Polymer Refine Detection. The demonstration of human Pax-5 is achieved by first, allowing the binding of Pax-5 (1EW) to the  
section, and then visualizing this binding using the reagents provided in the detection system. The use of these products, in combination  
with the automated Bond system, reduces the possibility of human error and inherent variability resulting from individual reagent dilution,  
manual pipetting and reagent application.  
Reagents Provided  
Pax-5 (1EW) is a mouse anti-human monoclonal antibody produced as a tissue culture supernatant, and supplied in Tris buffered saline  
TM  
with carrier protein, containing 0.35% ProClin 950 as a preservative.  
Total volume = 7 mL.  
Clone  
1EW.  
Immunogen  
Recombinant protein corresponding to part of the C-terminus of the human Pax-5 molecule.  
Specificity  
Human Pax-5.  
Subclass  
IgG1.  
Total Protein Concentration  
Approx 10 mg/mL.  
Antibody Concentration  
Greater than or equal to 0.34 mg/L as determined by ELISA.  
Dilution and Mixing  
Pax-5 (1EW) primary antibody is optimally diluted for use on the Bond system. Reconstitution, mixing, dilution or titration of this reagent  
is not required.  
Materials Required But Not Provided  
Refer to “Using Bond Reagents” in your Bond user documentation for a complete list of materials required for specimen treatment and  
immunohistochemical staining using the Bond system.  
Storage and Stability  
Store at 2–8 °C. Do not use after the expiration date indicated on the container label.  
The signs indicating contamination and/or instability of Pax-5 (1EW) are: turbidity of the solution, odor development, and presence of  
precipitate.  
Return to 2–8 °C immediately after use.  
Storage conditions other than those specified above must be verified by the user1.  
Precautions  
This product is intended for in vitro diagnostic use.  
The concentration of ProClin 950 is 0.35%. It contains the active ingredient 2-methyl-4-isothiazolin-3-one, and may cause irritation to  
the skin, eyes, mucous membranes and upper respiratory tract. Wear disposable gloves when handling reagents.  
To obtain a copy of the Material Safety Data Sheet contact your local distributor or regional office of Leica Biosystems, or  
Specimens, before and after fixation, and all materials exposed to them, should be handled as if capable of transmitting infection and  
disposed of with proper precautions2. Never pipette reagents by mouth and avoid contacting the skin and mucous membranes with  
reagents or specimens. If reagents or specimens come in contact with sensitive areas, wash with copious amounts of water. Seek  
medical advice.  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 2  
Consult Federal, State or local regulations for disposal of any potentially toxic components.  
Minimize microbial contamination of reagents or an increase in non-specific staining may occur.  
Retrieval, incubation times or temperatures other than those specified may give erroneous results. Any such change must be  
validated by the user.  
Instructions for Use  
Pax-5 (1EW) primary antibody was developed for use on the automated Bond system in combination with Bond Polymer Refine  
Detection. The use of Peroxide Block as the first step in IHC Staining Protocol F will affect the staining achieved with this antibody, for  
this reason the recommended staining protocol for Pax-5 (1EW) is an edited version of IHC Staining Protocol F, where the Peroxide  
Block step before the MARKER has been deleted and a peroxide block step has been inserted after the MARKER. This modified staining  
protocol needs to be created by the user. For instructions on how to edit protocols Refer to “Adding and removing protocol steps ” in your  
Bond user documentation. Heat induced epitope retrieval is recommended using Bond Epitope Retrieval Solution 2 for 20 minutes.  
Results Expected  
Normal Tissues  
Pax-5 is a B cell specific nuclear transcription factor that is expressed in pro B, pre B and mature B cells. Clone 1EW detected the  
Pax-5 protein in follicular and non-follicular B cells of tonsil 3/3, spleen 3/3, colon 3/3 and small bowel 3/3. Staining of occasional B  
lymphocytes was also seen in a variety other tissues 33/69, including adrenal, kidney, esophagus, stomach, liver, pancreas, lung, skin,  
prostate, cervix, breast, thyroid, thymus, bone marrow, and pituitary.  
Tumor Tissues  
Clone 1EW stained 14/14 diffuse large B cell lymphomas, 6/6 follicle center lymphomas, 3/3 MALTomas, 1/1 mantle cell lymphomas, 1/1  
Burkitt’s lymphoma, 1/1 T cell rich B cell lymphoma, 5/5 Hodgkin’s disease and 0/11 T cell lymphomas. No staining was observed in a  
variety of non-hematological malignancies (n=41).  
Pax-5 (1EW) is recommended for use as part of a panel of antibodies for the identification of malignancies of B cell origin.  
Product Specific Limitations  
Pax-5 (1EW) has been optimized at Leica Biosystems for use with Bond Polymer Refine Detection and Bond ancillary reagents.  
Users who deviate from recommended test procedures must accept responsibility for interpretation of patient results under these  
circumstances. The protocol times may vary, due to variation in tissue fixation and the effectiveness of antigen enhancement, and must  
be determined empirically. Negative reagent controls should be used when optimizing retrieval conditions and protocol times.  
Troubleshooting  
Refer to reference 3 for remedial action.  
Contact your local distributor or the regional office of Leica Biosystems to report unusual staining.  
Further Information  
Further information on immunostaining with Bond reagents, under the headings Principle of the Procedure, Materials Required,  
Specimen Preparation, Quality Control, Assay Verification, Interpretation of Staining, Key to Symbols on Labels, and General Limitations  
can be found in “Using Bond Reagents” in your Bond user documentation.  
Bibliography  
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.  
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious  
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.  
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.  
4. Hansson M, Jerkeman M and Dictor M. Biphenotypic bigenotypic lymphoma with simultaneous expression of PAX5/BSAP and B- and  
T-cell markers. European Journal of Haematology. 2007; 79:159–165.  
ProClin 950 is a trademark of Supelco, a part of Sigma-Aldrich Corporation.  
Date of Issue  
05 February 2013  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 3  
Anticorps Primaire Prêt À LEmploi Bond  
Pax-5 (1EW)  
Référence: PA0552  
Utilisation prévue  
Ce réactif est destiné au diagnostic in vitro.  
L’anticorps monoclonal Pax-5 (1EW) est conçu pour l’identification qualitative en microscopie optique de l’antigène Pax-5 humain sur  
TM  
tissu fixé au formol, inclus en paraffine, par marquage immunohistochimique automatisé Bond .  
L’interprétation clinique de tout marquage ou de son absence doit être complétée par des études morphologiques utilisant des contrôles  
appropriés et évaluée dans le contexte des antécédents cliniques du patient et des autres tests diagnostiques par un pathologiste  
qualifié.  
Résumé et explications  
Les techniques immunohistochimiques peuvent être utilisées pour la mise en évidence d’antigènes sur tissus ou cellules (voir “Utilisation  
des réactifs Bond” dans votre manuel d’utilisation Bond). L’anticorps primaire Pax-5 (1EW) est prêt à l’emploi et a été spécialement  
optimisé pour Bond Polymer Refine Detection. La mise en évidence de la molécule Pax-5 humaine est effectuée en hybridant Pax-5  
(1EW) sur la coupe, puis en visualisant le complexe avec les réactifs du système de détection. L’utilisation de ces produits, en  
association avec l’automate Bond, réduit les possibilités d’erreurs humaines et de variations lors des dilutions, du pipetage manuel et de  
l’application des réactifs.  
Réactifs fournis  
Pax-5 (1EW) est un anticorps monoclonal anti-humain de souris, produit par surnageant de culture de tissu et conditionné dans du  
TM  
tampon salin Tris avec une protéine de transport, contenant 0,35% de ProClin 950 comme conservateur.  
Volume total = 7 ml.  
Clone  
1EW.  
Immunogène  
Protéine recombinante correspondant à la partie C-terminale de la molécule Pax-5 humaine.  
Spécificité  
Pax-5 humaine.  
Sous-classe  
IgG1.  
Concentration totale en protéine  
Environ 10 mg/ml.  
Concentration en anticorps  
Supérieure ou égale à 0,34 mg/l, déterminée par ELISA.  
Dilution et mélange  
L’anticorps primaire Pax-5 (1EW) est à dilution optimale pour utilisation dans Bond. Reconstitution, mélange, dilution ou titration de ce  
réactif non nécessaire.  
Matériel nécessaire mais non fourni  
Voir “Utilisation des réactifs Bond” dans votre manuel d’utilisation pour obtenir la liste complète du matériel nécessaire au traitement des  
échantillons et au marquage immunohistochimique avec Bond.  
Conservation et stabilité  
Conserver à une température comprise entre 2–8 °C. Ne pas utiliser après la date de péremption indiquée sur l’étiquette du récipient.  
Les signes indicateurs d’une contamination et/ou d’une instabilité de Pax-5 (1EW) sont les suivants : une turbidité de la solution, la  
formation d’odeurs et la présence d’un précipité.  
Remettre à 2–8 °C immédiatement après usage.  
Des conditions de stockage différentes de celles ci-dessus doivent être contrôlées par l’utilisateur1.  
Précautions  
Ce produit est conçu pour le diagnostic in vitro.  
La concentration en ProClin 950 est de 0,35%. Contient du 2-méthyl-4-isothiazoline-3-one et peut entraîner des irritations de la  
peau, des yeux, des muqueuses et des voies aériennes supérieures. Porter des gants jetables lors de la manipulation des réactifs.  
Pour obtenir une copie de la fiche de données de sécurité, contactez votre distributeur local ou le bureau régional de Leica  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 4  
Les échantillons, avant et après fixation, et tous les matériels ayant été en contact avec eux, devraient être manipulés comme s’ils  
étaient à risque infectieux et éliminés avec les précautions adéquates2. Ne jamais pipeter les réactifs à la bouche et éviter le contact  
de la peau et des muqueuses avec les réactifs ou les échantillons. Si des réactifs ou des échantillons entrent en contact avec des  
zones sensibles, rincer abondamment à l’eau. Consultez un médecin.  
Renseignez-vous sur les règlements fédéraux, nationaux et locaux pour l’élimination des composés potentiellement toxiques.  
Éviter une contamination microbienne des réactifs qui peut entraîner un marquage non spécifique.  
Des durées ou températures de démasquage ou d’incubation autres que celles spécifiées peuvent entraîner des résultats erronés.  
Tout changement doit être validé par l’utilisateur.  
Mode d’emploi  
L’anticorps primaire Pax-5 (1EW) a été conçu pour être utilisé sur l’automate Bond conjointement avec Bond Polymer Refine Detection.  
L’utilisation de Peroxide Block comme première étape du protocole de maquage IHC Protocol F affecte le marquage obtenu avec cet  
anticorps, c’est pourquoi le protocole de marquage recommandé pour Pax-5 (1EW) est une version modifiée de IHC Protocol F, où  
l’étape Peroxide Block avant le MARKER a été supprimée et une étape Peroxide Block insérée après le MARKER. Ce protocole de  
marquage modifié doit être créé par l’utilisateur. Pour des instructions sur la modification des protocoles, consultez la section “Ajout  
et suppression d’étapes de protocole” dans la documentation de l’utilisateur Bond. Un démasquage d’épitope par la chaleur est  
recommandé avec Bond Epitope Retrieval Solution 2 durant 20 minutes.  
Résultats attendus  
Tissus sains  
Pax-5 est un facteur de transcription nucléaire spécifique des cellules B qui s’exprime dans les cellules pro B, pré B et B matures. Le  
clone 1EW a détecté la protéine Pax-5 dans les cellules B folliculaires et non folliculaires d’amygdales 3/3, de rate 3/3, de côlon 3/3  
et d’intestin grêle 3/3. Le marquage occasionnel de lymphocytes B a aussi été observé dans divers autres tissus 33/69, notamment  
surrénales, reins, œsophage, estomac, foie, pancréas, poumons, peau, prostate, col de l’utérus, seins, thyroïde, thymus, moelle  
osseuse et hypophyse.  
Tissus tumoraux  
Le clone 1EW a marqué 14/14 lymphomes à grandes cellules B diffuses, 6/6 lymphomes centrofolliculaires, 3/3 MALTomes, 1/1  
lymphome à cellules du manteau, 1/1 lymphome de Burkitt, 1/1 lymphome B riche en cellules T, 5/5 maladies de Hodgkin et 0/11  
lymphomes à cellules T. Aucun marquage n’a été observé dans diverses malignités non hématologiques (n=41).  
Pax-5 (1EW) est recommandé dans le cadre d’un panel d’anticorps pour l’identification de malignités dont l’origine est les cellules B.  
Limites spécifiques du produit  
Le Pax-5 (1EW) a été optimisé par Leica Biosystems pour être utilisé avec Bond Polymer Refine Detection et les réactifs accessoires  
Bond. Les utilisateurs qui ne respectent pas les procédures recommandées prennent la responsabilité de l’interprétation des résultats  
des patients dans ces conditions. Les durées du protocole peuvent varier, en raison des variations de fixation des tissus et de l’efficacité  
de la facilitation de l’antigène, et doivent être déterminées empiriquement. Des contrôles réactif négatifs devraient être testés lors de  
l’optimisation des conditions de démasquage et des durées du protocole.  
Identification des problèmes  
Voir la référence 3 pour connaître les mesures correctives.  
Prenez contact avec votre distributeur local ou avec le bureau régional de Leica Biosystems pour signaler tout marquage inattendu.  
Informations complémentaires  
Des informations complémentaires sur l’immunomarquage avec les réactifs Bond, les principes de la méthode, le matériel nécessaire, la  
préparation des échantillons, le contrôle qualité, les vérifications d’analyse, l’interprétation du marquage, les légendes et symboles sur  
les étiquettes et les limites générales, peuvent être obtenues dans “Utilisation des réactifs Bond” dans votre manuel d’utilisation Bond.  
Bibliographie  
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.  
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious  
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.  
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.  
4. Hansson M, Jerkeman M and Dictor M. Biphenotypic bigenotypic lymphoma with simultaneous expression of PAX5/BSAP and B- and  
T-cell markers. European Journal of Haematology. 2007; 79:159–165.  
ProClin 950 est une marque commerciale de Supelco, membre du groupe Sigma-Aldrich Corporation.  
Date de publication  
05 février 2013  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 5  
Anticorpo Primario Pronto All’uso Bond  
Pax-5 (1EW)  
N. catalogo: PA0552  
Uso previsto  
Reagente per uso diagnostico in vitro.  
L’uso dell’anticorpo monoclonale Pax-5 (1EW) è previsto per l’identificazione qualitativa con microscopio ottico del Pax-5 umano in  
TM  
tessuto fissato in formalina, incluso in paraffina, con colorazione immunoistochimica, utilizzando il sistema automatizzato Bond .  
L’interpretazione clinica di un’eventuale colorazione, o della sua assenza, deve avvalersi di studi morfologici e di opportuni controlli ed  
essere effettuata da patologi qualificati, nel contesto dell’anamnesi clinica del paziente e di altri test diagnostici.  
Sommario e spiegazione  
Grazie alle tecniche di immunoistochimica è possibile dimostrare la presenza di antigeni nel tessuto e nelle cellule (vedere “Uso dei  
reagenti Bond” nella documentazione per l’utente Bond). L’anticorpo primario Pax-5 (1EW) è un prodotto pronto per l’uso che è stato  
ottimizzato in modo specifico per l’impiego con il Bond Polymer Refine Detection. La dimostrazione del Pax-5 umano si ottiene in primo  
luogo consentendo il legame del Pax-5 (1EW) con la sezione, e quindi visualizzando il legame stesso per mezzo dei reagenti forniti  
nel sistema di rilevazione. L’impiego di questi prodotti, insieme al sistema automatizzato Bond, riduce la possibilità di un errore umano  
e la relativa variabilità che deriva dalla diluizione individuale del reagente e dal pipettamento e dall’applicazione del reagente eseguiti  
manualmente.  
Reagenti forniti  
Il Pax-5 (1EW) è un anticorpo monoclonale murino anti-umano prodotto come surnatante di coltura tissutale e fornito in soluzione salina  
TM  
tamponata Tris con proteina carrier, contenente 0,35% di ProClin 950 come conservante.  
Volume totale = 7 ml.  
Clone  
1EW.  
Immunogeno  
Proteina ricombinante che corrisponde alla porzione C-terminale della molecola del Pax-5 umano.  
Specificità  
Pax-5 umano.  
Sottoclasse  
IgG1.  
Concentrazione proteica totale  
Circa 10 mg/ml.  
Concentrazione dell’anticorpo  
Uguale o superiore a 0,34 mg/l, determinata mediante ELISA.  
Diluizione e miscelazione  
La diluizione dell’anticorpo primario Pax-5 (1EW) è stata ottimizzata per l’uso con il sistema Bond. Non è necessario ricostituire,  
miscelare, diluire o titolare il reagente.  
Materiale necessario non fornito  
Per un elenco completo del materiale necessario per il trattamento del campione e la colorazione immunoistochimica con il sistema  
Bond, consultare l’ “Uso dei reagenti Bond” nella documentazione per l’utente Bond.  
Conservazione e stabilità  
Conservare a 2–8 °C. Non utilizzare dopo la data di scadenza indicata sull’etichetta del contenitore.  
I segni di contaminazione e/o instabilità del Pax-5 (1EW) sono: torbidità della soluzione, formazione di odori e presenza di un precipitato.  
Dopo l’uso riportare immediatamente a 2–8 °C.  
L’utente deve verificare eventuali condizioni di conservazione diverse da quelle specificate1.  
Precauzioni  
Il prodotto è destinato all’uso diagnostico in vitro.  
La concentrazione di ProClin 950 è 0,35%. Esso contiene il principio attivo 2-metil-4-isotiazolin-3-one e può causare irritazione alla  
cute, agli occhi, alle membrane mucose e alle alte vie respiratorie. Per la manipolazione dei reagenti usare guanti monouso.  
Una copia della Scheda di sicurezza può essere richiesta al distributore locale o all’ufficio di zona di Leica Biosystems o, in  
I campioni, prima e dopo la fissazione, e tutti i materiali esposti ad essi devono essere manipolati come potenziali vettori di infezione  
e smaltiti con le opportune precauzioni2. Non pipettare mai i reagenti con la bocca ed evitare il contatto dei reagenti e dei campioni  
con la pelle e le mucose. Se un reagente o un campione viene a contatto con superfici sensibili, lavare abbondantemente con acqua.  
Consultare un medico.  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 6  
Consultare la normativa nazionale, regionale o locale vigente per lo smaltimento dei componenti potenzialmente tossici.  
Ridurre al minimo la contaminazione microbica dei reagenti per evitare il rischio di una colorazione non specifica.  
Tempi o temperature di incubazione o di riconoscimento diversi da quelli specificati possono fornire risultati erronei. Ogni eventuale  
modifica deve essere validata dall’utente.  
Istruzioni per l’uso  
L’anticorpo primario Pax-5 (1EW) è stato sviluppato per essere utilizzato con il sistema automatizzato Bond in associazione con il Bond  
Polymer Refine Detection. L’impiego del Peroxide Block come prima fase dell’IHC Staining Protocol F influisce sulla colorazione che  
si ottiene con questo anticorpo; per questo motivo il protocollo di colorazione consigliato per il Pax-5 (1EW) è una versione modificata  
dell’IHC Staining Protocol F, nella quale la fase del Peroxide Block prima del MARKER è stata eliminata ed è stata inserita una fase di  
blocco con il Peroxide Block il MARKER. Questo protocollo di colorazione modificato deve essere creato dall’utente. Per le istruzioni su  
come modificare i protocolli consultare “Aggiunta e rimozione delle fasi del protocollo” nella documentazione per l’utente Bond. Per lo  
smascheramento termoindotto dell’epitopo si consiglia l’uso della Bond Epitope Retrieval Solution 2 per 20 minuti.  
Risultati attesi  
Tessuti normali  
Il Pax-5 è un fattore di trascrizione nucleare specifico dei linfociti B, espresso nei prolinfociti B, nei linfociti pre-B e nei linfociti B maturi.  
Il clone 1EW ha rilevato la proteina Pax-5 nei linfociti B follicolari e non follicolari della tonsilla (3/3), della milza (3/3), del colon (3/3) e  
dell’intestino tenue (3/3). La colorazione di qualche linfocito B è stata osservata occasionalmente anche in diversi altri tessuti (33/69),  
tra i quali surrene, rene, esofago, stomaco, fegato, pancreas, polmone, cute, prostata, cervice uterina, mammella, tiroide, timo, midollo  
osseo e ipofisi (n= ).  
Tessuti tumorali  
Il clone 1EW ha colorato 14/14 linfomi diffusi a grandi cellule B, 6/6 linfomi centrofollicolari, 3/3 MALTomi, 1/1 linfoma a cellule del  
mantello, 1/1 linfoma di Burkitt, 1/1 linfoma a cellule B ricco in cellule T, 5/5 linfomi di Hodgkin e 0/11 linfomi a cellule T. Nessuna  
colorazione è stata osservata in diverse altre neoplasie non ematologiche (n=41).  
Si raccomanda l’uso del Pax-5 (1EW) come parte di un gruppo di anticorpi per l’identificazione delle neoplasie che traggono origine dai  
linfociti B.  
Limitazioni specifiche del prodotto  
Il Pax-5 (1EW) è stato ottimizzato da Leica Biosystems per l’uso con il Bond Polymer Refine Detection e con i reagenti ausiliari Bond.  
Gli utenti che modificano le procedure raccomandate devono assumersi la responsabilità dell’interpretazione dei risultati relativi ai  
pazienti in tali circostanze. I tempi del protocollo possono variare in base alle variazioni nella fissazione del tessuto e nell’efficienza del  
potenziamento dell’antigene e devono essere definiti in modo empirico. Nell’ottimizzazione delle condizioni di riconoscimento e dei tempi  
del protocollo si devono impiegare dei controlli negativi del reagente .  
Soluzione problemi  
Per i provvedimenti consultare il riferimento bibliografico n. 3.  
Per riferire una colorazione inusuale rivolgersi al distributore locale o all’ufficio di zona di Leica Biosystems.  
Ulteriori informazioni  
Ulteriori informazioni sull’immunocolorazione con i reagenti Bond si trovano in “Uso dei reagenti Bond” nella documentazione per  
l’utente Bond, ai titoli Principio della procedura, Materiali necessari, Preparazione del campione, Controllo di qualità, Verifica del saggio,  
Interpretazione della colorazione, Leggenda dei simboli e delle etichette e Limitazioni generali.  
Bibliografia  
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.  
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious  
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.  
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.  
4. Hansson M, Jerkeman M and Dictor M. Biphenotypic bigenotypic lymphoma with simultaneous expression of PAX5/BSAP and B- and  
T-cell markers. European Journal of Haematology. 2007; 79:159–165.  
ProClin 950 è un marchio di fabbrica di Supelco, società del gruppo Sigma-Aldrich.  
Data di pubblicazione  
05 febbraio 2013  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 7  
Gebrauchsfertiger Bond Primärantikörper  
Pax-5 (1EW)  
Bestellnr.: PA0552  
Verwendungszweck  
Dieses Produkt ist für die In-vitro-Diagnostik bestimmt.  
Der monoklonale Antikörper Pax-5 (1EW) ist für den qualitativen lichtmikroskopischen Nachweis des humanen Pax-5 in  
TM  
formalinfixiertem, in Paraffin eingebettetem Gewebe durch immunhistochemische Färbung mit dem automatischen Bond System  
vorgesehen.  
Die klinische Auswertung der An- oder Abwesenheit einer Färbung sollte durch morphologische Untersuchungen und geeignete  
Kontrollen ergänzt werden und sollte im Zusammenhang mit der Krankengeschichte des Patienten und anderen diagnostischen Tests  
von einem qualifizierten Pathologen vorgenommen werden.  
Zusammenfassung und Erläuterung  
Immunhistochemische Methoden können dazu verwendet werden, die Anwesenheit von Antigenen in Geweben und Zellen zu  
demonstrieren (sehen Sie dazu “Das Arbeiten mit Bond-Reagenzien” in Ihrem Bond-Benutzerhandbuch). Der Primärantikörper Pax-5  
(1EW) ist ein gebrauchsfertiges Produkt, das speziell für den Gebrauch mit dem Bond Polymer Refine Detection optimiert wurde. Der  
Nachweis des humanen Pax-5 erfolgt durch die Bindung von Pax-5 (1EW) an das Präparat und die anschließende Sichtbarmachung  
dieser Bindung mit den Reagenzien, die im Detektionssystem bereitgestellt werden. Die Verwendung dieser Produkte zusammen mit  
dem automatischen Bond-System reduziert die Wahrscheinlichkeit menschlicher Fehler und die natürlichen Schwankungen, die beim  
individuellen Verdünnen von Reagenzien, dem manuellen Pipettieren und dem Auftragen der Reagenzien entstehen.  
Mitgelieferte Reagenzien  
Pax-5 (1EW) ist ein monoklonaler Maus-Anti-Human-Antikörper, der aus Zellkulturüberstand hergestellt wurde, in Tris-gepufferter  
Salzlösung mit einem Trägerprotein geliefert wird und 0,35% ProClinTM 950 als Konservierungsmittel enthält.  
Gesamtvolumen = 7 ml.  
Klon  
1EW.  
Immunogen  
Rekombinantes Protein, das einem C-terminalen Teil des humanen Pax-5-Moleküls entspricht.  
Spezifität  
Humanes Pax-5.  
Subklasse  
IgG1.  
Gesamtproteinkonzentration  
Ca. 10 mg/ml.  
Antikörperkonzentration  
Größer als oder gleich 0,34 mg/l, bestimmt mit ELISA.  
Verdünnung und Mischung  
Der Primärantikörper Pax-5 (1EW) ist optimal für den Gebrauch mit dem Bond-System verdünnt. Rekonstitution, Mischen, Verdünnen  
oder Titrieren dieses Reagenzes ist nicht erforderlich.  
Erforderliche, aber nicht mitgelieferte Materialien  
Eine vollständige Liste der Materialien, die für die Probenbehandlung und die immunhistochemische Färbung mit dem Bond-System  
benötigt werden, befindet sich im Abschnitt “Das Arbeiten mit Bond-Reagenzien” in Ihrem Bond-Benutzerhandbuch.  
Lagerung und Stabilität  
Bei 2–8 °C lagern. Nach dem Ablauf des auf dem Behälteretikett angegebenen Verfallsdatums nicht mehr verwenden.  
Zeichen, die auf eine Kontamination und/oder Instabilität von Pax-5 (1EW) hinweisen, sind eine Trübung der Lösung,  
Geruchsentwicklung und das Vorhandensein von Präzipitat.  
Unmittelbar nach Gebrauch wieder bei 2–8 °C aufbewahren.  
Andere als die oben angegebenen Lagerungsbedingungen müssen vom Anwender selbst getestet werden1.  
Vorsichtsmaßnahmen  
Dieses Produkt ist für die In-vitro-Diagnostik bestimmt.  
Die Konzentration von ProClin 950 beträgt 0,35%. Es enthält 2-Methyl-4-isothiazolin-3-on als aktiven Bestandteil und kann  
Reizungen der Haut, Augen, Schleimhäute und oberen Atemwege verursachen. Tragen Sie beim Umgang mit Reagenzien  
Einweghandschuhe.  
Ein Exemplar des Sicherheitsdatenblattes erhalten Sie von Ihrer örtlichen Vertriebsfirma, von der Regionalniederlassung von Leica  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 8  
Behandeln Sie Präparate vor und nach der Fixierung sowie sämtliche damit in Berührung kommenden Materialien so, als ob diese  
Infektionen übertragen können und entsorgen Sie sie unter Beachtung der entsprechenden Vorsichtsmaßnahmen2. Pipettieren Sie  
Reagenzien niemals mit dem Mund und vermeiden Sie den Kontakt von Haut und Schleimhäuten mit Reagenzien oder Präparaten.  
Falls Reagenzien oder Präparate mit empfindlichen Bereichen in Kontakt gekommen sind, spülen Sie diese mit reichlich Wasser.  
Holen Sie anschließend ärztlichen Rat ein.  
Beachten Sie bei der Entsorgung potentiell toxischer Bestandteile die behördlichen und örtlichen Vorschriften.  
Mikrobielle Kontaminationen sollten minimiert werden, da es sonst zu einer Zunahme unspezifischer Färbungen kommen kann.  
Die Verwendung anderer als den angegebenen Retrievals, Inkubationszeiten oder Temperaturen kann zu fehlerhaften Ergebnissen  
führen. Diesbezügliche Änderungen müssen vom Anwender selbst getestet werden.  
Gebrauchsanleitung  
Der Primärantikörper Pax-5 (1EW) wurde für die Verwendung mit dem automatischen Bond-System in Verbindung mit dem Bond  
Polymer Refine Detection entwickelt. Durch die Verwendung von Peroxide Block im ersten Schritt des IHC Protocol F wird die mit  
diesem Antikörper erreichte Färbung beeinträchtigt. Aus diesem Grund ist das empfohlene Färbeprotokoll für Pax-5 (1EW) eine  
angepasste Version des IHC-Färbeprotokolls F, bei dem der Schritt mit Peroxide Block vor dem MARKER gelöscht und nach dem  
MARKER ein Schritt zum Peroxide Block eingefügt wurde. Dieses modifizierte Färbeprotokoll muss vom Benutzer erstellt werden.  
Informationen zum Bearbeiten von Protokollen finden Sie im Abschnitt “Hinzufügen und Entfernen von Protokollschritten” in Ihrem  
Bond-Benutzerhandbuch. Das hitzeinduzierte Epitop-Retrieval wird unter Verwendung der Bond Epitope Retrieval Solution 2 für 20  
Minuten empfohlen.  
Erwartete Ergebnisse  
Normale Gewebe  
Pax-5 ist ein B-Zell-spezifischer nukleärer Transkriptionsfaktor, der in Pro-B-, Prä-B- und reifen B-Zellen exprimiert wird. Klon 1EW  
erkannte das Pax-5-Protein in follikulären und nicht follikulären B-Zellen der Tonsillen (3/3), Milz (3/3) und des Dünndarms (3/3).  
Eine Färbung von vereinzelten B-Lymphozyten wurde auch in verschiedenen anderen Geweben beobachtet (33/69), darunter in der  
Nebenniere, Niere, Speiseröhre, dem Magen, der Leber, dem Pankreas, der Lunge, Haut, Prostata, Cervix, Mamma, Schilddrüse, dem  
Thymus, Knochenmark und der Hypophyse.  
Tumorgewebe  
Klon 1EW färbte 14/14 diffusen großzelligen B-Zell-Lymphomen, 6/6 follikulären Lymphomen, 3/3 MALTomen, 1/1 Mantelzell-Lymphom,  
1/1 Burkitt-Lymphom, 1/1 T-Zell-reichen B-Zell-Lymphom, 5/5 Hodgkin-Lymphomen und 0/11 T-Zell-Lymphomen. Bei verschiedenen  
anderen nicht-hämatologischen Malignitäten wurde keine Färbung beobachtet (n=41).  
Pax-5 (1EW) wird zur Verwendung als Teil einer Reihe von Antikörpern zur Identifizierung von Malignitäten mit B-Zell-Herkunft  
empfohlen.  
Produktspezifische Einschränkungen  
Pax-5 (1EW) wurde von Leica Biosystems zur Verwendung mit dem Bond Polymer Refine Detection und Bond-Zusatzreagenzien  
optimiert. Anwender, die andere als die empfohlenen Testverfahren verwenden, müssen unter diesen Umständen die Verantwortung  
für die Auswertung der Patientenergebnisse übernehmen. Die Verfahrenszeiten können aufgrund von Unterschieden in der  
Gewebefixierung und der Wirksamkeit der Antigenverstärkung variieren und müssen empirisch bestimmt werden. Bei der Optimierung  
der Retrieval-Bedingungen und Verfahrenszeiten sollten negative Reagenzkontrollen eingesetzt werden.  
Fehlersuche  
Maßnahmen zur Abhilfe beim Auftreten von Fehlern finden Sie in Referenz 3.  
Falls Sie ungewöhnliche Färbeergebnisse beobachten, wenden Sie sich an Ihre örtliche Vertriebsfirma oder an die  
Regionalniederlassung von Leica Biosystems.  
Weitere Informationen  
Weitere Informationen zur Immunfärbung mit Bond-Reagenzien finden Sie in den Abschnitten Grundlegende Vorgehensweise,  
Erforderliches Material, Probenvorbereitung, Qualitätskontrolle, Assay-Verifizierung, Deutung der Färbung, Schlüssel der Symbole auf  
den Etiketten und Allgemeine Einschränkungen in “Das Arbeiten mit Bond-Reagenzien” in Ihrem Bond-Benutzerhandbuch.  
Bibliografie  
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.  
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious  
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.  
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.  
4. Hansson M, Jerkeman M and Dictor M. Biphenotypic bigenotypic lymphoma with simultaneous expression of PAX5/BSAP and B- and  
T-cell markers. European Journal of Haematology. 2007; 79:159–165.  
ProClin 950 ist eine Marke von Supelco, einem Unternehmen der Sigma-Aldrich Corporation.  
Ausgabedatum  
05 Februar 2013  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 9  
Anticuerpo Primario Listo Para Usar Bond  
Pax-5 (1EW)  
Catálogo Nº.: PA0552  
Indicaciones de uso  
Este reactivo es para uso diagnóstico in vitro.  
El anticuerpo monoclonal Pax-5 (1EW) está destinado a utilizarse en la identificación cualitativa por microscopía óptica de la molécula  
Pax-5 humana en tejidos fijados en formalina e incluidos en parafina, mediante tinción inmunohistoquímica con el sistema automatizado  
TM  
Bond .  
La interpretación clínica de cualquier tinción o de la ausencia de ésta debe complementarse con estudios morfológicos y controles  
adecuados, y debe evaluarla un patólogo cualificado junto con el historial clínico del paciente y con otras pruebas diagnósticas.  
Resumen y explicación  
Las técnicas inmunohistoquímicas pueden ser utilizadas para detectar la presencia de antígenos en tejidos y células (véase “Utilización  
de reactivos Bond” en la documentación de usuario suministrada por Bond). El anticuerpo primario Pax-5 (1EW) es un producto listo  
para usar que se ha optimizado específicamente para su uso con Bond Polymer Refine Detection. La demostración de la molécula  
Pax-5 humana se consigue, en primer lugar, permitiendo la unión de Pax-5 (1EW) a la sección y, a continuación, visualizando esta unión  
con los reactivos que proporciona el sistema de detección. El uso de estos productos, en combinación con el sistema automatizado  
Bond, reduce la posibilidad de errores humanos y la variabilidad inherente resultante de la dilución de cada reactivo, el pipeteo manual  
y la aplicación del reactivo.  
Reactivos proporcionados  
Pax-5 (1EW) es un anticuerpo monoclonal antihumano de ratón que se produce como sobrenadante en cultivos de tejido, y se  
TM  
suministra en solución salina tamponada de Tris con proteína portadora, que contiene el 0,35% de ProClin 950 como conservante.  
Volumen total = 7 mL.  
Clon  
1EW.  
Inmunógeno  
Proteína recombinante correspondiente a parte de la región terminal C de la molécula Pax-5 humana.  
Especificidad  
Molécula Pax-5 humana.  
Subclase  
IgG1.  
Concentración total de proteína  
Aprox. 10 mg/mL.  
Concentración de anticuerpos  
Mayor o igual que 0,34 mg/L según lo determinado mediante ELISA.  
Dilución y mezcla  
El anticuerpo primario Pax-5 (1EW) se presenta en dilución óptima para su uso en el sistema Bond. No es necesaria la reconstitución,  
mezcla, dilución o titulación de este reactivo.  
Material necesario pero no suministrado  
Consulte, en el apartado “Uso de reactivos Bond” de la documentación de usuario de Bond, la lista completa del material necesario para  
el tratamiento de las muestras y la tinción inmunohistoquímica cuando se utiliza el sistema Bond.  
Conservación y estabilidad  
Ddebe conservarse a 2–8 °C. No se debe utilizar después de la fecha de caducidad que aparece en la etiqueta del recipiente.  
Los signos que indican la contaminación y/o inestabilidad de Pax-5 (1EW) son: turbidez de la solución, aparición de olor y presencia de  
precipitado.  
Volver a guardar a 2–8 °C inmediatamente después de su uso.  
Si las condiciones de conservación son diferentes de las especificadas, el usuario debe realizar las comprobaciones necesarias1.  
Precauciones  
Este producto es para uso diagnóstico in vitro.  
La concentración de ProClin 950 es 0,35%. Contiene el principio activo 2-metil-4-isotiazolin-3-ona, que puede producir irritación en  
la piel, ojos, mucosas y tracto respiratorio superior. Lleve siempre guantes desechables cuando manipule los reactivos.  
Si desea obtener un ejemplar de la Hoja de datos de seguridad de las sustancias, póngase en contacto con su distribuidor o con la  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 10  
Las muestras, antes y después de ser fijadas, y cualquier material en contacto con ellas, deben ser tratadas como sustancias  
capaces de transmitir infecciones y deben ser eliminadas con las precauciones correspondientes2. No pipetee nunca los reactivos  
con la boca, y evite el contacto de la piel y las mucosas con reactivos o muestras. Si los reactivos o las muestras entran en contacto  
con zonas sensibles, lávelas enseguida con abundante agua. Consulte a un médico.  
Consulte la normativa federal, nacional o local referente a la eliminación de sustancias potencialmente tóxicas.  
Minimice la contaminación microbiana de los reactivos, ya que puede producir un aumento de las tinciones inespecíficas.  
Los tiempos de exposición e incubación, y las temperaturas diferentes de las especificadas pueden dar resultados erróneos.  
Cualquier cambio que se produzca deberá ser validado por el usuario.  
Instrucciones de uso  
El anticuerpo primario Pax-5 (1EW) se ha desarrollado para su uso en el sistema automatizado Bond en combinación con Bond  
Polymer Refine Detection. El uso de Peroxide Block como primer paso de IHC Staining Protocol F afectará a la tinción lograda con  
este anticuerpo; por este motivo, el protocolo de tinción recomendado para Pax-5 (1EW) es una versión modificada de IHC Staining  
Protocol F, donde el paso Peroxide Block anterior a MARKER se ha eliminado y se ha insertado un paso de Peroxide Block después de  
MARKER. Este protocolo de tinción modificado debe ser creado por el usuario. Para ver instrucciones sobre cómo modificar protocolos,  
consulte “Añadir y eliminar pasos de protocolo” en la documentación del usuario de Bond. Se recomienda la exposición de epítopos  
inducida por calor usando Bond Epitope Retrieval Solution 2 durante 20 minutos.  
Resultados esperados  
Tejidos normales  
Pax-5 e un factor de transcripción nuclear específico de células B que se expresa en las células pro B, pre B y B maduras. El clon 1EW  
detectó la proteína Pax-5 en células B foliculares y no foliculares de amígdala 3/3, bazo 3/3, colon 3/3 e intestino delgado 3/3. También  
se observó tinción ocasional de linfocitos B en otros diversos tejidos 33/69, incluidos glándula adrenal, riñón, esófago, estómago,  
hígado, páncreas, pulmón, piel, próstata, cérvix, mama, tiroides, timo, médula ósea y pituitaria.  
Tejidos tumorales  
El clon 1EW tiñó 14/14 linfomas difusos de células B grandes, 6/6 linfomas centrales foliculares, 3/3 MALTomas, 1/1 linfomas de células  
del manto, 1/1 linfoma de Burkitt, 1/1 linfoma de células B rico en células T, 5/5 linfomas de Hodgkin y 0/11 linfomas de células T. No se  
observó ninguna tinción en diversos tumores malignos no hematológicos (n=41).  
Pax-5 (1EW) se recomienda para su uso como parte de un panel de anticuerpos para la identificación de tumores malignos con origen  
en células B.  
Limitaciones específicas del producto  
Pax-5 (1EW) se ha optimizado en Leica Biosystems para su uso con Bond Polymer Refine Detection y reactivos auxiliares Bond Los  
usuarios que se aparten de los procedimientos de análisis recomendados deben asumir la responsabilidad de interpretar los resultados  
del paciente tomando en cuenta estas circunstancias. Los tiempos del protocolo pueden diferir debido a las variaciones en la fijación de  
los tejidos y en la eficacia de la preservación del antígeno, y deben determinarse empíricamente. Se debe utilizar controles negativos  
con reactivos a la hora de optimizar las condiciones de detección y los tiempos de protocolo.  
Resolución de problemas  
Consulte la referencia 3 para ver las acciones correctoras.  
Contacte con su distribuidor local o con la oficina regional de Leica Biosystems para informar de cualquier tinción anómala.  
Para obtener más información  
Para obtener más información sobre inmunotinciones con reactivos Bond, consulte los apartados Principio del procedimiento, Material  
necesario, Preparación de las muestras, Control de calidad, Verificación del análisis, Interpretación de la tinción, Clave de símbolos en  
las etiquetas y Limitaciones generales de la sección “Utilización de reactivos Bond” de la documentación de usuario suministrada por  
Bond.  
Bibliografía  
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.  
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious  
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.  
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.  
4. Hansson M, Jerkeman M and Dictor M. Biphenotypic bigenotypic lymphoma with simultaneous expression of PAX5/BSAP and B- and  
T-cell markers. European Journal of Haematology. 2007; 79:159–165.  
ProClin 950 es una marca registrada de Supelco, parte de Sigma-Aldrich Corporation.  
Fecha de publicación  
05 de febrero de 2013  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 11  
Anticorpo Primário Pronto a Usar Bond  
Pax-5 (1EW)  
Nº de catálogo: PA0552  
Utilização a que se destina  
Este reagente destina-se a utilização diagnóstica in vitro.  
O anticorpo monoclonal Pax-5 (1EW) destina-se a ser utilizado na identificação qualitativa por microscopia óptica de Pax-5 humano em  
TM  
tecidos fixos com formalina e incluídos em parafina por coloração imunohistoquímica utilizando o sistema Bond automatizado.  
A interpretação clínica de qualquer coloração ou da sua ausência deve ser complementada por estudos morfológicos utilizando  
controlos adequados, e deve ser avaliada no contexto da história clínica do doente e de outros testes complementares de diagnóstico  
por um anátomo-patologista qualificado.  
Resumo e Explicação  
As técnicas de imunohistoquímica podem ser utilizadas para demonstrar a presença de antigénios em tecidos e células (ver “Utilizar  
os Reagentes Bond” na documentação do utilizador Bond). O anticorpo primário Pax-5 (1EW) consiste num produto pronto usar que  
foi especificamente optimizado para utilização com Bond Polymer Refine Detection. A demonstração de Pax-5 humano é obtida por,  
primeiro, permitindo a ligação de Pax-5 (1EW) à secção e visualizando-a posteriormente utilizando os reagentes fornecidos no sistema  
de detecção. A utilização destes produtos, em combinação com o sistema Bond automatizado, reduz a possibilidade de erro humano e  
da variabilidade inerente resultante da diluição do reagente individual, pipetagem manual e aplicação de reagente.  
Reagentes Fornecidos  
Pax-5 (1EW) é um anticorpo monoclonal anti-humano de ratinho produzido como sobrenadante de cultura tecidular e fornecida em  
TM  
solução salina com tampão Tris com proteína transportadora, contendo 0,35% de ProClin 950 como conservante.  
Volume total = 7 mL.  
Clone  
1EW.  
Imunogénio  
Proteína recombinante procariota correspondente à região C-terminal da molécula Pax-5 humana.  
Especificidade  
Pax-5 humana.  
Subclasse  
IgG1.  
Concentração de Proteínas Totais  
Aproximadamente 10 mg/mL.  
Concentração de anticorpos  
Maior ou igual a 0,34 mg/L conforme determinado por ELISA.  
Diluição e mistura  
O anticorpo primário Pax-5 (1EW) apresenta-se com uma diluição ideal para utilização no sistema Bond. Não é necessária  
reconstituição, mistura, diluição ou titulação deste reagente.  
Material necessário, mas não fornecido  
Consultar “Usar os reagentes Bond” na sua documentação do utilizador Bond para uma lista completa de materiais necessários para  
tratamento de amostras e coloração imunohistoquímica usando o sistema Bond.  
Armazenamento e Estabilidade  
Armazene a uma temperatura de 2–8 °C. Não utilize após o fim do prazo de validade referido no rótulo do recipiente.  
Os sinais que indicam contaminação e/ou instabilidade de Pax-5 (1EW) são: turvação da solução, desenvolvimento de odor e presença  
de precipitado.  
Coloque entre 2–8 °C imediatamente depois de utilizar  
Condições de armazenamento diferentes das acima especificadas devem ser confirmadas pelo utilizador 1  
.
Precauções  
Esteproduto destina-se a utilização diagnóstica in vitro.  
A concentração de ProClin 950 é de 0,35%. Contém o ingrediente activo 2-metil-4-isotiazolina-3-a e pode provocar irritação da  
pele, olhos, membranas mucosas e vias aéreas superiores. Use luvas descartáveis quando manipular os reagentes. Use luvas  
descartáveis quando manipular os reagentes.  
Para obter uma cópia da Ficha de Dados de Segurança do Material, entre em contacto com o seu distribuidor local ou sucursal  
PA0552 Rev B  
Page 12  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
As amostras, antes e depois da fixação, e todo o material que a elas seja exposto, devem ser manipulados como se fossem capazes  
de transmitir infecção e eliminados usando as precauções adequadas2. Nunca pipete reagentes com a boca e evite o contacto entre  
a pele e membranas mucosas com reagentes ou amostras. Se reagentes ou amostras entrarem em contacto com os olhos, lave-os  
com uma quantidade abundante de água. Consultar um médico.  
Consulte os regulamentos federais, estatais e locais relativamente à eliminação de quaisquer componentes potencialmente tóxicos.  
Minimize a contaminação microbiana dos reagentes ou poderá ocorrer um aumento da coloração inespecífica.  
A utilização de tempos e temperaturas de recuperação e incubação diferentes dos especificados pode produzir resultados erróneos.  
Qualquer alteração deste tipo deve ser validada pelo utilizador.  
Instruções de utilização  
O anticorpo primário Pax-5 (1EW) foi desenvolvido para utilização no sistema Bond automatizado em combinação com a Bond Polymer  
Refine Detection. A utilização do Peroxide Block como o primeiro passo no Protocolo de Coloração IHC F irá afectar a coloração  
obtida com este anticorpo, pelo que o protocolo de coloração recomendado para Pax-5 (1EW) consiste numa versão editada do IHC  
Protocol F, em que o passo do Peroxide Block antes do MARKER foi apagado e inserido um bloco de bloqueio com peroxide depois  
do MARKER. O protocolo de coloração modificado tem que ser criado pelo utilizador. Para instruções sobre como editar os protocolos,  
Consulte “Adicionar e remover passos do protocolo” na sua documentação do utilizador Bond. Recomenda-se a recuperação de  
epitopos induzida por calor utilizando a Bond Epitope Retrieval Solution 2 durante 20 minutos.  
Resultados esperados  
Tecidos normais  
Pax-5 consiste num factor de transcrição nuclear específico para linfócitos B que é expresso em linfócitos pró-B, pré-B e B maduros.  
O Clone 1EW detectou a proteína Pax-5 em linfócitos B foliculares e não foliculares da amígdala 3/3, baço 3/3, cólon 3/3 e intestino  
delgado 3/3. Também se observou uma coloração ocasional de linfócitos B numa ampla variedade outros tecidos 33/69, incluindo supra-  
renal, rim, esófago, estômago, fígado, pâncreas, pulmão, pele, próstata, colo do útero, mama, tiróide, timo, medula óssea e pituitária.  
Tecidos tumorais  
O clone 1EW corou 14/14 linfomas difusos B, 6/6 linfomas de centro folicular, 3/3 MALTomas, 1/1 linfomas de células do manto, 1/1  
linfoma de Burkitt, 1/1 linfoma B rico em linfócitos T, 5/5 casos de doença de Hodgkin e 0/11 linfomas T. Não foi observada coloração em  
várias outras doenças malignas não hematológicas (n=41).  
Pax-5 (1EW) está recomendado para utilização como parte de um painel de anticorpos para a identificação de doenças malignas com  
origem nos linfócitos B.  
Limitações Específicas para o Produto  
Pax-5 (1EW) foi optimizado na Leica Biosystems para utilização com Bond Polymer Refine Detection e reagentes auxiliares Bond.  
Utilizadores que se desviem dos procedimentos de teste recokmendados devem assumir a responsabilidade pela interpretação dos  
resultados dos doentes nestas circunstâncias. Os tempos de protocolo podem variar, devido a variações na fixação tecidular e na  
eficácia de valorização com antigénios, devendo ser determinados de forma empírica. Os controlos de reagente negativos devem ser  
usados quando se optimizam as condições de recuperação e os tempos do protocolo.  
Resolução de problemas  
Consulte a referência 3 para acções de resolução.  
Entre em contacto com o seu distribuidor local ou com a sucursal regional da Leica Biosystems para notificar qualquer coloração pouco  
habitual.  
Informações Adicionais  
Poderá encontrar informações adicionais sobre imunocoloração com reagentes Bond nas secções de Princípios do Procedimento,  
Material Necessário, Preparação da Amostra, Controlo de Qualidade, Verificação do Ensaio, Interpretação da Coloração, Significado  
dos Símbolos nos Rótulos e Limitações Gerais em “Utilizar os Reagentes Bond”na sua documentação do utilizador Bond.  
Bibliografia  
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.  
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious  
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.  
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.  
4. Hansson M, Jerkeman M and Dictor M. Biphenotypic bigenotypic lymphoma with simultaneous expression of PAX5/BSAP and B- and  
T-cell markers. European Journal of Haematology. 2007; 79:159–165.  
ProClin 950 é uma marca registada de Supelco, parte da Sigma-Aldrich Corporation.  
Data de Emissão  
05 de Fevereiro de 2013  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 13  
Bond Primär Antikropp - Färdig Att Användas  
Pax-5 (1EW)  
Artikelnummer: PA0552  
Användningsområde  
Reagenset är avsett för in vitro-diagnostik.  
Den monoklonala antikroppen Pax-5 (1EW) är avsedd att användas för kvalitativ bestämning i ljusmikroskopi av human Pax-5-antigen i  
TM  
formalinfixerad, paraffininbäddad vävnad, genom immunhistokemisk färgning i det automatiska systemet Bond  
.
Den kliniska tolkningen av varje infärgning, eller utebliven infärgning, måste alltid kompletteras med morfologiska studier och lämpliga  
kontroller. Utvärderingen bör göras av kvalificerad patolog och inkludera patientens anamnes och övriga diagnostiktester.  
Förklaring och sammanfattning  
Med immunhistokemiska metoder kan man påvisa förekomsten av antigener i vävnad och celler (se “Använda Bond-reagens” i  
användardokumentationen från Bond). Primär antikropp Pax-5 (1EW) är en bruksfärdig produkt som speciellt optimerats för användning  
med Bond Polymer Refine Detection. Påvisande av human Pax-5 uppnås genom att man först låter Pax-5 (1EW) binda till snittet  
och därefter visualiserar denna bindning med hjälp av de reagens som ingår i detektionssystemet. Användning av dessa produkter  
tillsammans med det automatiska Bond-systemet reducerar risken för mänskliga misstag och för den inherenta spridning som orsakas  
av individuell reagensutspädning, manuell pipettering och manuell reagenstillsättning.  
Ingående reagenser  
Pax-5 (1EW) är en anti-human monoklonal antikropp från mus, producerad som supernatant från cellkultur. Den levereras i trisbuffrad  
TM  
koksaltlösning med bärarprotein. Lösningen innehåller 0,35% ProClin 950 som konserveringsmedel.  
Total volym = 7 ml.  
Klon  
1EW.  
Immunogen  
Rekombinant protein motsvarande en del av den C-terminus av den humana Pax-5-molekylen.  
Specificitet  
Humant Pax-5.  
Subklass  
IgG1.  
Total proteinkoncentration  
Ungefär 10 mg/ml.  
Antikroppskoncentration  
Större än eller lika med 0,34 mg/l, enligt bestämning med ELISA.  
Spädning och blandning  
Primär antikropp Pax-5 (1EW) är optimalt utspädd för användning på systemet Bond. Denna reagens behöver varken rekonstitueras,  
blandas, spädas eller titreras.  
Nödvändig materiel som ej medföljer  
I “Använda Bond-reagens” i Bond-användardokumentationen finns en fullständig lista med den materiel du behöver för att behandla ett  
prov och göra en immunhistokemisk färgning med Bond-systemet.  
Förvaring och stabilitet  
Förvara vid 2–8 °C. Använd inte efter det utgångsdatum som anges på flaskans etikett.  
Tecken som indikerar kontaminering och/eller instabilitet hos Pax-5 (1EW) är: grumling i lösningen, luktutveckling och förekomst av  
fällning.  
Ställ tillbaka i 2–8 °C omedelbart efter användning.  
Andra förvaringsbetingelser än de ovan angivna måste verifieras av användaren1.  
Säkerhetsåtgärder  
Produkten är avsedd för in vitro-diagnostik.  
Koncentrationen av ProClin 950 är 0,35%. Den aktiva ingrediensen 2-metyl-4-isotiazolin-3-on kan orsaka irritationer i hud, ögon,  
slemhinnor och de övre luftvägarna. Använd engångshandskar när du hanterar reagens.  
Du kan få tag på ett säkerhetsdatablad genom att kontakta en lokal distributör eller Leica Biosystems regionkontor, eller besöka Leica  
Prover, både före och efter fixering, samt all materiel som exponeras för dem, bör behandlas och avfallshanteras som potentiellt  
smittbärande material2. Munpipettera aldrig reagens och undvik att hud eller slemhinnor kommer i kontakt med reagens eller prover.  
Om reagens eller prover skulle komma i kontakt med känsliga områden bör du tvätta dig med rikliga mängder vatten. Kontakta  
läkare.  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 14  
Angående avfallshantering av potentiellt toxiska material hänvisar vi till gällande europeiska, nationella och lokala bestämmelser och  
förordningar.  
Minimera mikrobiologisk kontamination av reagenser, annars kan en ökad icke-specifik infärgning bli resultatet.  
Retrieval, inkubationstider eller temperaturer som avviker mot dem angivna kan ge felaktiga resultat. Varje sådan förändring måste  
valideras av användaren.  
Bruksanvisning  
Den primära antikroppen Pax-5 (1EW) har utvecklats för användning på det automatiserade systemet Bond i kombination med Bond  
Polymer Refine Detection. Användningen av Peroxide Block som det första steget i IHC Staining Protocol F påverkar den färgning  
som åstadkoms med denna antikropp, och av denna orsak är det rekommenderade färgningsprotokollet för Pax-5 (1EW) en redigerad  
version av IHC Staining Protocol F, där Peroxide Block-steget före MARKER har tagits bort och ett peroxide block har infogats efter  
MARKER. Detta modifierade färgningsprotokoll måste skapas av användaren. För instruktioner om hur man redigerar protokoll,  
se “Lägga till och ta bort steg i protokoll” i Bond-användardokumentationen. Värmeinducerat epitop-retrieval rekommenderas med  
användande av Bond Epitope Retrieval Solution 2 i 20 minuter.  
Förväntade resultat  
Normala vävnader  
Pax-5 är en B-cellsspecifik nukleär transkriptionsfaktor som är uttryckt i pro B-, pre B- och mogna B-celler. Clone 1EW detekterade Pax-  
5-protein i follikulära och icke-follikulära B-celler av tonsill 3/3, mjälte 3/3, tarm 3/3 och tunntarm 3/3. Färgning av enstaka B-lymfocyter  
observerades också i ett flertal andra vävnader 33/69, inklusive från binjure, njure, matstrupe, magsäck, lever, pankreas, lunga, hud,  
prostata, livmoderhals, bröst, sköldkörtel, tymus, benmärg och hypofys.  
Tumörvävnader  
Klon 1EW färgade 14/14 diffusa stora B-cellslymfom, 6/6 follikelcenterlymfom, 3/3 MALT-lymfom, 1/1 mantelcellslymfom, 1/1 Burkitts  
lymfom, 1/1 T-cellsrikt B-cellslymfom, 5/5 Hodkins sjukdom och 0/11 T-cellslymfom. Ingen färgning observerades i ett flertal icke-  
hematologiska maligniteter (n=41).  
Pax-5 (1EW) rekommenderas för användning i en panel av antikroppar för identifiering av maligniteter av B-cellsursprung.  
Produktspecifika begränsningar  
Pax-5 (1EW) har optimerats vid Leica Biosystems för användning med Bond Polymer Refine Detection och Bond hjälpreagenser.  
Användare som inte följer rekommenderade testprotokoll måste ta på sig ansvaret för att korrekt tolka patientresultat under dessa  
förhållanden. Som följd av variationer i vävnadsfixering och effektivitet hos antigensförstärkningen kan protokollets tider variera och de  
måste fastställas empiriskt. Negativa reagenskontroller bör användas när man optimerar betingelser för retrieval och protokolltider.  
Felsökning  
Se referens 3 för förslag till åtgärder.  
Kontakta en lokal distributör eller Leica Biosystems regionkontor för att rapportera onormal infärgning.  
Mer information  
Mer information om immunfärgning med Bond-reagens finns under rubrikerna Bakgrund till metoden, Nödvändig materiel, Förbereda  
provet, Kvalitetskontroll, Verifiering av assayer, Tolka infärgningsresultat, Symbolförklaring för etiketter och Allmänna begränsningar i  
“Använda Bond-reagens” i Bonds användardokumentation.  
Bibliografi  
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.  
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious  
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.  
3. Bancroft JD och Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.  
4. Hansson M, Jerkeman M and Dictor M. Biphenotypic bigenotypic lymphoma with simultaneous expression of PAX5/BSAP and B- and  
T-cell markers. European Journal of Haematology. 2007; 79:159–165.  
ProClin 950 är ett varumärke för Supelco som ingår i Sigma-Aldrich Corporation.  
Utgivningsdatum  
05 februari 2013  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 15  
Έτοιμο Για Χρήση Πρωτογενές Αντίσωμα Bond  
Pax-5 (1EW)  
Αρ. καταλόγου: PA0552  
Σκοπός χρήσης  
Αυτό το αντιδραστήριο προορίζεται για in vitro διαγνωστική χρήση.  
Το μονοκλωνικό αντίσωμα Pax-5 (1EW) προορίζεται για χρήση για την ποιοτική ταυτοποίηση με μικροσκοπία φωτός του  
ανθρώπινου Pax-5 σε μονιμοποιημένο σε φορμόλη και ενσωματωμένο σε παραφίνη ιστό με ανοσοϊστοχημική χρώση, με χρήση του  
TM  
αυτοματοποιημένου συστήματος Bond .  
Η κλινική ερμηνεία οποιασδήποτε χρώσης ή της απουσίας της θα πρέπει να συμπληρώνεται με μορφολογικές μελέτες και σωστούς  
μάρτυρες και θα πρέπει να αξιολογείται στα πλαίσια του κλινικού ιστορικού του ασθενούς και άλλων διαγνωστικών εξετάσεων από  
ειδικευμένο παθολογοανατόμο.  
Περίληψη και επεξήγηση  
Μπορούν να χρησιμοποιηθούν ανοσοϊστοχημικές μέθοδοι για την κατάδειξη της παρουσίας αντιγόνων στον ιστό και τα κύτταρα (δείτε  
“Χρήση αντιδραστηρίων Bond” στο υλικό τεκμηρίωσης χρήσης του Bond). Το πρωτογενές αντίσωμα Pax-5 (1EW) είναι ένα έτοιμο για  
χρήση προϊόν που έχει βελτιστοποιηθεί ειδικά για χρήση με το Bond Polymer Refine Detection. Η κατάδειξη του ανθρώπινου Pax-5  
επιτυγχάνεται πρώτα επιτρέποντας τη δέσμευση του Pax-5 (1EW) στην τομή και μετά οπτικοποιώντας αυτή τη δέσμευση με τη χρήση  
των αντιδραστηρίων που παρέχονται στο σύστημα ανίχνευσης. Η χρήση αυτών των προϊόντων, σε συνδυασμό με το αυτοματοποιημένο  
σύστημα Bond, μειώνει την πιθανότητα του ανθρώπινου σφάλματος και την εγγενή ποικιλότητα που προκαλείται από αραίωση  
συγκεκριμένου αντιδραστηρίου, χειροκίνητη αναρρόφηση με πιπέτα και εφαρμογή αντιδραστηρίου.  
Αντιδραστήρια που παρέχονται  
Το Pax-5 (1EW) είναι ένα μονοκλωνικό αντι-ανθρώπινο αντίσωμα ποντικού που παράγεται ως υπερκείμενο ιστοκαλλιέργειας και  
TM  
παρέχεται σε αλατούχο ρυθμιστικό διάλυμα Tris με πρωτεΐνη φορέα, που περιέχει 0,35% ProClin 950 ως συντηρητικό.  
Συνολικός όγκος = 7 mL  
Κλώνος  
1EW.  
Ανοσογόνο  
Ανασυνδυασμένη πρωτεΐνη που αντιστοιχεί σε ένα τμήμα του C-τελικού άκρου του ανθρώπινου μορίου Pax-5.  
Ειδικότητα  
Ανθρώπινο Pax-5.  
Υποκατηγορία  
IgG1.  
Συνολική συγκέντρωση πρωτεΐνης  
Περίπου 10 mg/mL.  
Συγκέντρωση αντισώματος  
Μεγαλύτερη ή ίση με 0,34 mg/L, όπως προσδιορίζεται με ELISA.  
Αραίωση και ανάμειξη  
Το πρωτογενές αντίσωμα Pax-5 (1EW) είναι βέλτιστα αραιωμένο για χρήση στο σύστημα Bond. Δεν απαιτείται ανασύσταση, ανάμειξη,  
αραίωση ή τιτλοδότηση αυτού του αντιδραστηρίου.  
Υλικά που απαιτούνται αλλά δεν παρέχονται  
Για μια πλήρη λίστα των υλικών που απαιτούνται για την επεξεργασία δειγμάτων και την ανοσοϊστοχημική χρώση με τη χρήση του  
συστήματος Bond, ανατρέξτε στην ενότητα “Χρήση αντιδραστηρίων Bond” στο υλικό τεκμηρίωσης χρήσης του Bond.  
Φύλαξη και σταθερότητα  
Φυλάσσετε στους 2–8 °C. Μη το χρησιμοποιήσετε μετά την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στην ετικέτα του δοχείου.  
Tα σημεία που υποδεικνύουν μόλυνση ή και αστάθεια του Pax-5 (1EW) είναι: θολότητα του διαλύματος, δημιουργία οσμής και παρουσία  
ιζήματος.  
Επαναφέρετε στους 2–8 °C αμέσως μετά τη χρήση.  
Συνθήκες φύλαξης εκτός από αυτές που καθορίζονται παραπάνω πρέπει να επαληθεύονται από τον χρήστη1.  
Προφυλάξεις  
Αυτό το προϊόν προορίζεται για in vitro διαγνωστική χρήση.  
Η συγκέντρωση του ProClin 950 είναι 0,35%. Περιέχει το ενεργό συστατικό 2-methyl-4-isothiazolin-3-one και μπορεί να προκαλέσει  
ερεθισμό του δέρματος, των ματιών, των βλεννογόνων μεμβρανών και της ανώτερης αναπνευστικής οδού. Φοράτε γάντια μίας  
χρήσης όταν χειρίζεστε αντιδραστήρια.  
Για να λάβετε ένα αντίτυπο του δελτίου δεδομένων ασφαλείας υλικού (Material Safety Data Sheet), επικοινωνήστε με τον τοπικό  
σας διανομέα ή τα περιφερειακά γραφεία της Leica Biosystems ή, εναλλακτικά, επισκεφθείτε τον ιστότοπο της Leica Biosystems,  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 16  
Ο χειρισμός των δειγμάτων, πριν και μετά τη μονιμοποίηση και όλων των υλικών που εκτίθενται σε αυτά, θα πρέπει να γίνεται ως  
εάν ήταν ικανά να μεταδώσουν μόλυνση και θα πρέπει να απορρίπτονται λαμβάνοντας κατάλληλες προφυλάξεις2. Μην κάνετε  
ποτέ αναρρόφηση αντιδραστηρίων με πιπέτα με το στόμα και αποφύγετε να έρθει σε επαφή το δέρμα και οι βλεννογόνοι με τα  
αντιδραστήρια ή τα δείγματα. Αν αντιδραστήρια ή δείγματα έρθουν σε επαφή με ευαίσθητες περιοχές, πλύνετέ τις με άφθονο νερό.  
Ζητήστε ιατρική συμβουλή.  
Συμβουλευτείτε τους ομοσπονδιακούς, πολιτειακούς ή τοπικούς κανονισμούς για απόρριψη τυχόν δυνητικώς τοξικών συστατικών.  
Ελαχιστοποιήστε τη μικροβιακή μόλυνση των αντιδραστηρίων, διότι ενδέχεται να συμβεί αύξηση μη ειδικής χρώσης.  
Ανάκτηση, χρόνοι επώασης ή θερμοκρασίες διαφορετικές από τις καθορισμένες, μπορεί να οδηγήσουν σε εσφαλμένα αποτελέσματα.  
Οποιαδήποτε τέτοια αλλαγή πρέπει να επικυρώνεται από τον χρήστη.  
Οδηγίες χρήσης  
Το πρωτογενές αντίσωμα Pax-5 (1EW) αναπτύχθηκε για χρήση στο αυτοματοποιημένο σύστημα Bond σε συνδυασμό με το Bond  
Polymer Refine Detection. Η χρήση του Peroxide Block ως το πρώτο βήμα στο ανοσοϊστοχημικό πρωτόκολλο χρώσης IHC Staining  
Protocol F θα επηρεάσει την χρώση που επιτυγχάνεται με αυτό το αντίσωμα. Για το λόγο αυτό, το συνιστώμενο πρωτόκολλο χρώσης  
για το Pax-5 (1EW) είναι μια τροποποιημένη εκδοχή του IHC Staining Protocol F, όπου το βήμα Peroxide Block πριν το MARKER  
έχει διαγραφεί και έχει εισαχθεί ένα βήμα Peroxide Block μετά το MARKER. Αυτό το τροποποιημένο πρωτόκολλo xρώσης πρέπει  
να δημιουργηθεί από τον χρήστη. Για οδηγίες για τον τρόπο τροποποίησης πρωτοκόλλων ανατρέξτε στην ενότητα “Προσθήκη και  
αφαίρεση βημάτων πρωτοκόλλων “ στο υλικό τεκμηρίωσης χρήσης του Bond. Συνιστάται ανάκτηση επιτόπου επαγόμενη με θερμότητα  
χρησιμοποιώντας το Bond Epitope Retrieval Solution 2 για 20 λεπτά.  
Αναμενόμενα αποτελέσματα  
Φυσιολογικοί ιστοί  
Το Pax-5 είναι ένας πυρηνικός παράγων μεταγραφής ειδικός των B κυττάρων που εκφράζεται σε προ-Β (pro-B), πρε-Β (pre-B) και  
ώριμα B κύτταρα. Ο κλώνος 1EW ανίχνευσε την πρωτεΐνη Pax-5 σε θυλακιώδη και μη θυλακιώδη κύτταρα B αμυγδαλής 3/3, σπλήνα  
3/3, κόλου 3/3 και λεπτού εντέρου 3/3. Χρώση περιστασιακών B λεμφοκυττάρων παρατηρήθηκε επίσης σε μια ποικιλία άλλων ιστών  
33/69, συμπεριλαμβανομένων του επινεφριδίου, νεφρού, οισοφάγου, στομάχου, ήπατος, παγκρέατος, πνεύμονα, δέρματος, προστάτη,  
τραχήλου, μαστού, θυρεοειδή, θύμου, μυελού των οστών και υπόφυσης.  
Νεοπλασματικοί ιστοί  
Με τον κλώνο 1EW χρώστηκαν 14/14 διάχυτα λεμφώματα εκ μεγάλων κυττάρων B, 6/6 λεμφοζιδιακά λεμφώματα, 3/3 λεμφώματα MALT,  
1/1 λέμφωμα από το κύτταρο του μανδύα, 1/1 λέμφωμα Burkitt, 1/1 B κυτταρικό λέμφωμα πλούσιο σε Τ-κύτταρα, 5/5 νόσοι του Hodgkin  
και 0/11 λεμφώματα κυττάρων T. Δεν παρατηρήθηκε χρώση σε μια ποικιλία μη αιματολογικών κακοηθειών (n=41).  
Το Pax-5 (1EW) συνιστάται για χρήση ως τμήμα ομάδας αντισωμάτων για την αναγνώριση των κακοηθειών με προέλευση εκ Β  
κυττάρων.  
Ειδικοί περιορισμοί του προϊόντος  
Το Pax-5 (1EW) έχει βελτιστοποιηθεί στην Leica Biosystems για χρήση με το Bond Polymer Refine Detection και τα βοηθητικά  
αντιδραστήρια Bond. Οι χρήστες που παρεκκλίνουν από τις συνιστώμενες διαδικασίες εξέτασης, πρέπει να αναλάβουν την ευθύνη  
για την ερμηνεία των αποτελεσμάτων των ασθενών υπό αυτές τις συνθήκες. Οι χρόνοι του πρωτοκόλλου μπορεί να διαφέρουν λόγω  
της διαφοροποίησης στη μονιμοποίηση του ιστού και την αποτελεσματικότητα της ενίσχυσης του αντιγόνου και συνεπώς πρέπει  
να προσδιορίζονται εμπειρικά. Για τη βελτιστοποίηση των συνθηκών ανάκτησης και των χρόνων του πρωτοκόλλου θα πρέπει να  
χρησιμοποιούνται δείγματα αντιδραστηρίου αρνητικού ελέγχου.  
Αντιμετώπιση προβλημάτων  
Ανατρέξτε στην παραπομπή 3 για τις διορθωτικές ενέργειες.  
Για να αναφέρετε περιπτώσεις ασυνήθιστης χρώσης, επικοινωνήστε με τον τοπικό σας διανομέα ή τα περιφερειακά γραφεία της Leica  
Biosystems.  
Πρόσθετες πληροφορίες  
Μπορείτε να βρείτε περισσότερες πληροφορίες σχετικά με την ανοσοχρώση με αντιδραστήρια Bond, υπό τους τίτλους “Αρχή της  
διαδικασίας”, “Απαιτούμενα υλικά”, “Προετοιμασία δείγματος”, “Ποιοτικός έλεγχος”, “Επαλήθευση προσδιορισμού”, “Ερμηνεία της  
χρώσης”, “Υπόμνημα για τα σύμβολα στις ετικέτες” και “Γενικοί περιορισμοί” στην ενότητα “Χρήση αντιδραστηρίων Bond” στο υλικό  
τεκμηρίωσης χρήσης του Bond.  
Bιβλιογραφία  
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.  
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious  
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.  
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.  
4. Hansson M, Jerkeman M and Dictor M. Biphenotypic bigenotypic lymphoma with simultaneous expression of PAX5/BSAP and B- and  
T-cell markers. European Journal of Haematology. 2007; 79:159–165.  
Το ProClin 950 είναι εμπορικό σήμα της Supelco, τμήμα της Sigma-Aldrich Corporation.  
Ημερομηνία έκδοσης  
05 Φεβρουαρίου 2013  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 17  
Bond Brugsklart Primaert Antistof  
Pax-5 (1EW)  
Katalognummer.: PA0552  
Tilsigtet anvendelse  
Dette reagens er beregnet til in vitro diagnostik.  
Monoklonalt Pax-5 (1EW)-antistof er beregnet til brug ved kvalitativ identifikation med lysmikroskopi af humant Pax-5 i formalinfikserede,  
TM  
paraffinindstøbte væv vha. immunhistokemisk farvning med det automatiske Bond system.  
Den kliniske fortolkning af enhver farvning eller fravær af samme skal ledsages af morfologiske undersøgelser og egnede kontroller samt  
evalueres af en uddannet patolog, som ser fortolkningen i kontekst med patientens anamnese samt andre diagnostiske prøver.  
Resumé og forklaring  
Immunhistokemiske teknikker kan anvendes til at påvise tilstedeværelsen af antigener i væv og celler (se “Anvendelse af Bond-  
reagenser” i Bond-brugervejledningen). Pax-5 (1EW) primært antistof er et brugsklart produkt, som er optimeret specielt til brug med  
Bond Polymer Refine Detection. Påvisningen af humant Pax-5 opnås ved først at lade Pax-5 (1EW) binde sig til præparatet, og derefter  
visualisere denne binding ved hjælp af de reagenser, der leveres med detektionssystemet. Brugen af disse produkter sammen med  
det automatiske Bond-system reducerer risikoen for menneskelige fejl og variabilitet som følge af individuel reagensfortynding, manuel  
pipettering og reagenspåførsel.  
Leverede reagenser  
Pax-5 (1EW) er et murint antihumant monoklonalt antistof produceret som en vævskultursupernatant leveret i Tris-bufferjusteret  
TM  
saltvandsopløsning med bærerprotein, indeholder 0,35% ProClin 950 som konserveringsmiddel.  
Volumen i alt = 7 ml.  
Klon  
1EW.  
Immunogen  
Rekombinant protein svarende til en del af C-terminalen på det humane Pax-5-molekyle.  
Specificitet  
Humant Pax-5.  
Underklasse  
IgG1.  
Total proteinkoncentration  
Ca. 10 mg/ml.  
Antistofkoncentration  
Større end eller lig med 0,34 mg/l bestemt med ELISA.  
Fortynding og blanding  
Pax-5 (1EW) primært antistof er optimalt fortyndet til brug på Bond-systemet. Rekonstitution, blanding, fortynding eller titrering af dette  
reagens er ikke påkrævet.  
Nødvendige materialer, der ikke medfølger  
Der henvises til “Anvendelse af Bond-reagenser” i Bond-brugervejledningen for en komplet liste over materialer, der er nødvendige til  
præparatbehandling og immunhistokemisk farvning ved hjælp af Bond-systemet.  
Opbevaring og stabilitet  
Opbevares ved 2–8 °C. Må ikke anvendes efter udløbsdatoen, som er angivet på etiketten på beholderen.  
Tegn, som indikerer, at Pax-5 (1EW) er kontamineret og/eller ustabilt: turbiditet af opløsningen, lugtudvikling og forekomst af præcipitat.  
Sættes tilbage til opbevaring ved 2–8 °C straks efter brug.  
Opbevaringsbetingelser, der adskiller sig fra de oven for specificerede, skal verificeres af brugeren1.  
Forholdsregler  
Dette produkt er beregnet til in vitro diagnostik.  
Koncentrationen af ProClin 950 er 0,35%. Det indeholder den aktive ingrediens 2-methyl-4-isothiazolin-3-one og kan give anledning  
til irritation af hud, øjne, slimhinder og øvre luftveje. Der skal anvendes engangshandsker ved håndtering af reagenserne.  
Det er muligt at få et sikkerhedsdatablad (Material Safety Data Sheet) ved henvendelse til den lokale forhandler, det regionale kontor  
Præparater, både før og efter fiksering, samt alle materialer eksponeret for præparater, skal håndteres som værende i stand til at  
overføre infektion og skal bortskaffes efter passende forholdsregler2. Afpipettér ikke reagenser med munden og undgå, at reagenser  
eller præparater kommer i kontakt med hud og slimhinder. Hvis reagenser eller præparater kommer i kontakt med følsomme områder,  
skal disse områder vaskes med rigelige mængder vand. Søg læge.  
Bortskaffelse af potentielt toksiske komponenter skal ske i overensstemmelse med gældende statslig eller lokal lovgivning.  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 18  
Mikrobiel kontaminering af reagenser skal minimeres for at undgå en øget uspecifik farvning.  
Genfinding og inkubationstider eller -temperaturer, som afviger fra de specificerede, kan give fejlagtige resultater. Enhver ændring  
heraf skal valideres af brugeren.  
Brugsanvisning  
Pax-5 (1EW) primært antistof er udviklet til brug på det automatiske Bond-system sammen med Bond Polymer Refine Detection.  
Anvendelsen af Peroxide Block som første trin i IHC-farvningsprotokol F vil påvirke den farvning, der er opnået med dette antistof, derfor  
er den anbefalede farvningsprotokol for Pax-5 (1EW) en tilpasset version af IHC-farvningsprotokol F, hvor trinnet med Peroxide Block  
før MARKER er slettet og et peroxide block trin er indsat efter MARKER. Den modificerede farvningsprotokol skal oprettes af brugeren.  
For vejledning om tilpasning af protokoller henvises til “Tilføjelse og fjernelse af protokoltrin” i Bond brugervejledningen. Varmeinduceret  
epitopgenfinding anbefales ved anvendelse af Bond Epitope Retrieval Solution 2 i 20 minutter.  
Forventede resultater  
Normalt væv  
Pax-5 er en B-celle-specifik nukleær transkriptionsfaktor, som udtrykkes i pro-B-, præ-B- og modne B-celler. Klon 1EW detekterede  
Pax-5-proteinet i follikulære og non-follikulære B-celler fra tonsil 3/3, milt 3/3, colon 3/3 og tyndtarm 3/3. Farvning af lejlighedsvise  
B-lymfocytter sås også i en række andre væv 33/69, herunder binyre, nyre, øsofagus, gaster, lever, pancreas, lunge, hud, prostata,  
cervix, mamma, thyreoidea, thymus, knoglemarv og hypofyse.  
Tumorvæv  
Klon 1EW farvede 14/14 diffust storcellede B-cellelymfomer, 6/6 follikelcenterlymfomer, 3/3 MALTomer, 1/1 mantlecellelymfom, 1/1  
Burkitts lymfom, 1/1 T-cellerigt B-cellelymfom, 5/5 Mb. Hodgkin og 0/11 T-cellelymfomer. Der sås ingen farvning i en række non-  
hæmatologiske maligniteter (n=41).  
Pax-5 (1EW) anbefales at indgå i et panel af antistoffer til identifikation af maligne lidelser af B-celle-oprindelse.  
Produktspecifikke begrænsninger  
Pax-5 (1EW) er optimeret af Leica Biosystems til brug med Bond Polymer Refine Detection og Bond hjælpereagenser. Brugere, som  
afviger fra de anbefalede undersøgelsesprocedurer, må under disse forhold selv tage ansvaret for fortolkningen af patientresultater.  
Protokoltiderne kan variere på grund af variation i vævsfiksering og effektiviteten i antigenfremhævning og skal bestemmes empirisk. Der  
skal anvendes negative reagenskontroller ved optimering af genfindingsforhold og protokoltider.  
Fejlfinding  
Se reference 3 for afhjælpende foranstaltninger.  
Kontakt venligst den lokale distributør eller Leica Biosystems’ regionale kontor for at rapportere usædvanlig farvning.  
Yderligere oplysninger  
Yderligere oplysninger om immunfarvning med Bond-reagenser kan findes i “Anvendelse af Bond-reagenser” i Bond-brugervejledningen  
under overskrifterne Proceduremæssige principper, Nødvendige materialer, Præparatklargøring, Kvalitetskontrol, Analyseverifikation,  
Fortolkning af farvning, Nøgle til symboler på etiketter og Generelle begrænsninger.  
Bibliografi  
1. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.  
2. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious  
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.  
3. Bancroft JD and Stevens A. Theory and Practice of Histological Techniques. 4th Edition. Churchill Livingstone, New York. 1996.  
4. Hansson M, Jerkeman M and Dictor M. Biphenotypic bigenotypic lymphoma with simultaneous expression of PAX5/BSAP and B- and  
T-cell markers. European Journal of Haematology. 2007; 79:159–165.  
ProClin 950 er et varemærke tilhørende Supelco, en del af Sigma-Aldrich Corporation.  
Udgivelsesdato  
05 februar 2013  
PA0552 Rev B  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Page 19  
PA0552 Rev B  
Page 20  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
PA0552 Rev B  
Page 21  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
PA0552 Rev B  
Page 22  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  
Leica Biosystems Newcastle Ltd  
Balliol Business Park West  
Benton Lane  
Newcastle Upon Tyne NE12 8EW  
United Kingdom  
(
+44 191 215 4242  
© Leica Biosystems Newcastle Ltd 95.7947 Rev A PA0552 05.02.2013  
Download from Www.Somanuals.com. All Manuals Search And Download.  

Lasko Fan 758000 User Manual
Life Fitness Stepper Machine LS8500 User Manual
Lightolier Work Light FBP450L User Manual
Link electronic Stereo Amplifier DigiFlex 1132 User Manual
Linn CD Player CD Playback System User Manual
Makita Impact Driver 6905B User Manual
Mamp;S Systems MP3 Player MC2000 User Manual
Matrix Audio Flat Panel Television 12X User Manual
Meridian Audio Speaker DSP3300 User Manual
Microsoft Computer Accessories 26916094 User Manual